微生物实验室常用灭菌方法有哪些？

微生物实验室是进行微生物研究的场所，对环境要求很高，必须保证实验室内的环境洁净安全，严格的消毒灭菌工作非常重要，影响着实验室顺利研究实验的顺利进行，同时严格的消毒灭菌也为实验室工作人员提供一个清洁而良好的工作环境。

目前，常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如，干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法两大类。

1.干热灭菌法

是利用恒温干燥箱内120℃-150℃的高热，并保持90-120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。

主要适用于不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。

2.湿热灭菌法

压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常见的一种灭菌方法。它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。

适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0-1.1 kg/cm2，维持20-30min即可达到灭菌效果。

3.过滤除菌法

是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。

目前，常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌，或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。滤膜孔径应在0.22-0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜，溶液通过滤膜后，细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻，并利用滤膜的吸附作用，阻制小于滤膜孔径的细菌透过。

4.射线灭菌法

利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。

适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。灭菌时间为30min。用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。

5.化学消毒剂消毒法

化学消毒剂使用范围比较广泛，可用于那些不能利用物理方法进行灭菌的物品、空气、工作面、操作者皮肤、某些实验器皿等。常用的化学消毒剂包括甲醛、高锰酸钾、70%-75%乙醇、过氧乙酸、新洁尔灭、环氧乙烷、以及过氧化氢等。但是普通的化学消毒剂有残留和腐蚀性，在使用时应注意安全，特别是用在皮肤或实验材料上的消毒剂，须选用合适的药剂种类、浓度和处理时间，才能达到安全和灭菌的目的。而目前最新食品级过氧化氢消毒剂具有安全绿色无残留的特点，可以进行实验材料的灭菌，同时搭配过氧化氢干雾灭菌器可以对无菌室和培养室的空气消毒。

微生物实验室是一个洁净度要求很高的环境，对于微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。对这些仪器的灭菌一般采用的是干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法或者是间歇灭菌方法，但是针对空间环境的灭菌，难度都是比较高的，过去一般采用的臭氧熏蒸或者是甲醛熏蒸的方法，目前微生物实验室消毒灭菌最佳方法：选用欧菲姆干雾过氧化氢灭菌，最新的过氧化氢干雾灭菌技术。

比林科汉干雾灭菌设备，是一种非常新型的灭菌方法，采用了全球最先进的雾化技术，雾化颗粒小于3微米，增效了空间扩散均匀性，迅速弥漫充满整个密闭空间不放过每一处死角，灭菌效果堪称空前绝后，欧菲姆干雾灭菌设备的特点可概括为：

－高效杀灭芽孢 对嗜热脂肪杆菌芽孢10分钟有6个对数值的杀灭率

－平均5um干雾颗粒，扩散性非常优良

－无色无毒，彻底代替甲醛，同时时间短只需要2个小时灭菌时间就可开始生产

－设备体积小，操作方便，灵活移动满足不同空间需求，适应大空间灭菌，灭菌过程短，因此可以简单的用于各个空间，极大节省成本，节省工作量

－腐蚀性小，无残留，安全可靠，完全分解为氧气和水，验证资料齐全，对多种材料兼容性

微生物实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。