如何处理PCR实验室污染

由于新型冠状病毒疫情的突发,各地PCR基因扩增实验室的建设也逐步加快,病毒核酸检测是新冠肺炎诊断的重要标准,PCR实验室又称为基因扩增实验室,利用分子生物学技术,通过放大核酸片段,也可以看做是生物体外的特殊核酸复制。利用基因追踪系统,掌握人体内部的病毒含量,试验的精确度可达到纳米级别,新型冠状病毒核酸检测也属于此类技术,是新冠肺炎诊断的重要标准。

 

PCR基因扩增实验室主要就是对检测核酸模板进行扩增,由此可见,最容易出现的就是对实验室交叉污染而导致检测的标本出现假阳性结果,所以,PCR实验室对预防交叉污染有着严格的设计要求和标准。

 

现在PCR技术已经在传染病、肿瘤靶向、生殖遗传等领域被广泛应用,但因为该技术对待测核酸进行了多次、大量的扩增,所以即使极微量的污染也容易导致结果出现假阳性;其次PCR技术要求相对较高,实验过程繁复,中间环节如果出现遗漏疏忽,就有可能导致结果假阴性。

 

PCR实验过程中易发生污染产生污染主要有以下4个原因:

 

1、是PCR扩增产物的污染。这也是最常见的污染原因。PCR产物经反复多次的扩增,其复制量远远超过PCR的检测极限,所以即使是极微量的污染也足以造成实验结果假阳性。

 

2、试剂的污染。在试剂的配制过程中,接触了污染的容器、移液器、枪头、溶液等物导致试剂被污染。

 

3、待测样品被污染。放置样品的容器被污染或由于容器密封不严导致样品与外界接触被污染;其次在核酸提取过程中使用了被污染的移液器或枪头导致样品被污染;另外,某些样品中含有病毒,若弥散到空气中则有可能形成交叉污染。

 

4、气溶胶污染。若气溶胶中包含病毒等污染物扩散至空气中极有可能造成PCR产物污染。气溶胶是由空气与液体表面摩擦而产生的,开盖、晃动反应管及污染加样器的反复吸样都可形成气溶胶从而导致交叉污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48000 拷贝,因此,应尤其重视由气溶胶导致污染的问题。PCR 实验室只要出现了污染,之前的结果报告就变为无效而且也无法进行其他的实验操作。必须找出并彻底清除污染源,才能得到准确有效的实验结果。

 

PCR实验室如何进行空间消毒预防污染?

针对PCR实验室的消毒,比林科汉KV-2000干雾灭菌设备,采用先进的过氧化氢干雾灭菌技术,达到枯草芽孢杆菌2.5×10的6次方的杀灭率。方便快捷,灭菌时间快,腐蚀性极低,安全无残留。

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3、干雾颗粒,扩散性非常优良,能扩散到每一个卫生死角落,在空气中做不规则布朗运动。

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